金黄色葡萄球菌多药耐药基因norA的克隆及其原核表达
2005-12-30分类号:Q78
【部门】吉林大学畜牧兽医学院 吉林大学畜牧兽医学院 沈阳农业大学畜牧兽医学院 长春130062 长春130062 沈阳100161
【摘要】按金黄色葡萄球菌多重耐药转运蛋白NorA的编码序列设计引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增出norA基因中1 155 bp cDNA片段,将所得片段与pMD18-T载体连接,转化到感受态大肠杆菌JM109中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒,经NdeⅠ和XhoⅠ酶切,回收1 155 bp目的片段,定向克隆到pET-28a(+)表达载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α,提取质粒,再次转化到BL21(DE3)中,成功地筛选到阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出norA基因的表达。
【关键词】金黄色葡萄球菌 norA基因 克隆 原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(30270999)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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