β-甘露聚糖酶基因克隆与在大肠杆菌中表达
2005-12-30分类号：Q78
【部门】湖南农业大学生物科学与技术学院 湖南农业大学生物科学与技术学院 湖南农业大学生物科学与技术学院 湖南省农业生物工程研究所 湖南农业大学生物科学与技术学院 湖南长沙410128 湖南省农业生物工程研究所 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128
【摘要】为了通过基因工程方法在大肠杆菌中发酵生产β-甘露聚糖酶,采用多重比较几种来源的β-甘露聚糖酶氨基酸序列,获得了该酶的保守结构域,并按此设计简并引物.以能水解魔芋葡甘聚糖的枯草杆菌属野生筛选菌种A33为材料,通过简并引物PCR法从A33基因组中扩增出β-甘露聚糖酶基因核心区段.经过克隆、测序及BLASTN比对分析,证实该DNA区段推导的编码蛋白具有β-甘露聚糖酶的保守结构域,属于该酶家族中的一员.将该片段构建到大肠杆菌表达载体pRSET-A并转入大肠杆菌表达系统BL21DE3(pLysS),经过诱导获得了此酶的高效表达.
【关键词】β-甘露聚糖酶 基因克隆 表达
【基金】湖南省科技厅重大攻关专项子项目(01NKY1002)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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