中国明对虾鳃细胞全长cDNA文库的构建
2004-10-30分类号：S945.1
【部门】中国水产科学研究院黄海水产研究所 中国水产科学研究院黄海水产研究所 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛266071 中国海洋大学生命科学与技术学部 青岛266003 青岛266071 青岛266071
【摘要】利用SMART (SwitchingMechanismat 5’endofRNATranscript)技术 ,以同源重组的方式构建了中国明对虾鳃细胞的全长cDNA文库。首先用RNA提取试剂盒从中国明对虾鳃细胞中提取总RNA ,以总RNA为模板 ,CDSⅢOligo(dT)为引物 ,反应一段时间后 ,再加入转换模板 (Switchingtemplate) ,反转录合成cDNA第 1链。在DNA聚合酶的作用下 ,通过长距离PCR ,扩增双链DNA。双链cDNA经凝胶过滤柱纯化后 ,与线性化的 pGADT7 Rec质粒载体同源重组 ,转化感受态AH10 9酵母菌株后 ,得到中国明对虾鳃细胞的全长cD...
【关键词】中国明对虾(Fenneropenaeuschinensis) 鳃细胞 全长cDNA文库
【基金】国家重点基础研究发展规划项目 (G1 9990 1 2 0 0 2 ); 国家自然科学基金项目 (30 2 71 0 2 0 ); 青岛市自然科学基金项目 (0 3 2 JZP 1 0 ); 山东省自然科学基金项目 (Q2 0 0 2D0 2 ); 中国水产科学研究院科研基金项目 (2 0 0 3 青 6)共同资助
【所属期刊栏目】海洋水产研究
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