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bcl-2/EGFP融合基因真核表达质粒的构建

2004-12-25分类号:R346

【作者】彭树英  安志兴  张涌
【部门】西北农林科技大学生物工程研究所  西北农林科技大学生物工程研究所  西北农林科技大学生物工程研究所 陕西杨凌712100   陕西杨凌712100   陕西杨凌712100
【摘要】 为深入研究bcl 2对细胞凋亡的调控机制和肿瘤发生发展的影响,应用基因重组手段,根据表达载体pEGFP C1上的多克隆位点和bcl 2基因序列设计了1对引物,对含有bcl 2基因的质粒pWB bcl进行了PCR扩增,得到了708bp的目的片断。将其克隆到pMD18 Tvector,筛选阳性克隆并测序,序列分析表明,其与原初序列同源性达99%。将bcl 2插入到载体启动子下游,与报告基因绿色荧光蛋白(EnhancerGreenFluorescentProtein,EGFP)融合,经限制性内切酶酶切和PCR鉴定,证明Bcl 2/EGFP真核表达质粒构建成功。
【关键词】bcl2  绿色荧光蛋白  真核表达质粒
【基金】国家"863"高科技项目(2001AA213081)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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