人表皮生长因子的基因克隆与原核表达
2004-02-25分类号：Q785
【部门】西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生物工程研究所 西北农林科技大学生命科学学院 生物工程研究所陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100
【摘要】 采用RT-PCR方法从人胎盘组织中扩增出hEGF基因,将其分别连入表达载体pGEX-4t-1(+)和pGEX-6p-1(+)质粒中,并转化入BL21-CodonplusTM中,解决了大肠杆菌密码子偏爱性问题,不需附加程序就可以编码稀有密码子的重组基因。SDS-PAGE结果证明,pGEX-4t-1(+)-hEGF和pGEX-6p-1(+)-hEGF分别在大肠杆菌BL21(DE3)-CodonplusTM-RP和BL21(DE3)-CodonplusTM-RIL中获得高效表达,目的蛋白占总菌体蛋白的30%左右。
【关键词】人表皮生长因子 基因克隆 偏爱密码子 基因表达
【基金】国家"863"基金项目(2001AA213081); 西北农林科技大学重点专题基金项目
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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