副溶血弧菌感染12h和24h杂色鲍肝脏全长cDNA文库的构建
2004-06-30分类号：S917
【部门】集美大学水产生物技术研究所水产学院 美国密歇根州立大学水产与野生生物系 集美大学水产生物技术研究所水产学院 集美大学水产生物技术研究所水产学院 集美大学水产生物技术研究所水产学院 福建厦门 361021 密歇根美国 福建厦门 361021 福建厦门 361021 福建厦门 361021
【摘要】采用RDP试剂提取杂色鲍(Haliotisdiversicolor)不同免疫时相肝脏的总RNA,经Oligotex试剂盒纯化得到mR NA。根据SMART(switchingmechanismat5′endofRNAtranscript)原理,利用含sfiIB酶切位点的Oligo(dT)引物合成cDNA第1条链,利用含sfiIA酶切位点的SMARTⅢ寡核苷酸作为cDNA第1条链在mRNA5′端延伸出去的模板,采用LD-PCR引物合成双链cDNA。双链cDNA用sfiI酶切和过柱分级分离后,与λTripEx2两臂进行连接,随后进行λ噬菌体体外包装反应,构建成杂色鲍不同免疫时相(12h和24h)全...
【关键词】杂色鲍 cDNA文库 SMART 免疫时相 肝脏
【基金】国家"863"高技术计划项目资助(2002AA629220)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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