日本脑炎病毒E基因抗原域Ⅲ的克隆及高效表达
2004-10-30分类号：S852.43
【部门】南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095 江苏南京210095沈阳农业大学畜牧兽医学院 辽宁沈阳110161 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095
【摘要】根据GenBank公布的日本脑炎病毒 (Japaneseencephalitisvirus ,JEV)SA14 14 2减毒株的核苷酸序列 ,设计并合成一对特异性引物 ,应用RT PCR方法扩增出编码JEV囊膜蛋白抗原域Ⅲ的基因 (EⅢ) ,将其连接入pMD18 T载体 ,经测序后克隆入原核表达载体pET 32a (+) ,构建原核表达载体pET EⅢ 。阳性质粒转化感受态大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导 ,JEV EⅢ 基因获得表达 ,经细胞定位分析 ,目的蛋白以包涵体的形式存在于大肠杆菌中。通过改变IPTG的浓度和诱导时间 ,确定了表达EⅢ 蛋白的最佳诱导条件 :IPTG...
【关键词】日本脑炎病毒 囊膜蛋白 克隆 原核表达
【基金】国家高技术发展计划资助项目 (2 0 0 1AA2 490 12 )
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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