猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列的表达与纯化
2004-09-25分类号：S828
【部门】湛江海洋大学现代生化中心 深圳科安信公司 湛江海洋大学现代生化中心 湛江海洋大学现代生化中心 湛江海洋大学现代生化中心 湛江海洋大学现代生化中心 湛江海洋大学现代生化中心 中国人民解放军军需大学生物化学与分子生物学教研室 广东湛江524088 广东深圳518057 广东湛江524088 广东湛江524088 广东湛江524088 广东湛江524088 广东湛江524088 吉林长春130062
【摘要】 猪肌生成抑制素基因myostatin(MSTN)的cDNA在去除信号肽后,对成熟蛋白编码序列PCR扩增出1.2kb片段,将该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109受体菌细胞,筛选阳性克隆,并测序分析,结果表明其与设计序列完全一致。将该克隆载体的质粒DNA用带有BamH 和Sal 内切酶识别序列的另1对引物进行PCR扩增,将回收的1.2kbPCR目的片段定向克隆到pET28a(+)表达载体上,成功地构建了猪肌生成抑制素成熟蛋白编码的原核表达载体。对成功构建的表达载体阳性克隆在LB液体培养基中用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳显示,重组菌表达的MS...
【关键词】猪肌生成抑制素基因 成熟蛋白编码序列 表达 纯化
【基金】国家自然科学基金项目(30070563); 军队医药卫生青年基金项目(98Q079)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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