关中奶山羊BAC文库构建条件研究
2004-06-25分类号:S827.94;Q785
【部门】军事医学科学院生物工程研究所 西北农林科技大学动物科技学院 军事医学科学院生物工程研究所 北京100071西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100徐州师范大学生物技术研究所 江苏徐州221116 北京100071
【摘要】 BAC(bacterialartificialchromosome,细菌人工染色体)是一种新发展起来的构建高等生物基因组文库的重要方法。由于关中奶山羊产奶性能好,成为制备乳腺生物反应器的理想动物之一,故对关中奶山羊BAC文库的构建条件进行了研究。用BamH 部分酶切关中奶山羊的基因组,用CHEF(箝位匀强电场)凝胶电泳分离大片段DNA,以电透析法回收DNA后,与酶切脱磷的pBeloBAC11载体连接,然后电激转化感受态细胞DH10β,得到了数千个阳性克隆,插入片段平均为30~40kb。在此过程中摸索了BAC载体制备、高分子量DNA制备、酶切、连接和电激转化等一系列环节对高效转化产生大片段DN...
【关键词】细菌人工染色体(BAC) 基因组文库 奶山羊
【基金】国家863重大专项(2002AA206621)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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