增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP在大肠杆菌中的表达与纯化
2004-10-30分类号：Q819
【部门】华中农业大学动物医学院动物病毒室 华中农业大学动物医学院动物病毒室 华中农业大学动物医学院动物病毒室 华中农业大学动物医学院动物病毒室 华中农业大学动物医学院动物病毒室 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070
【摘要】增强型绿荧光蛋白突变体mut4EGFP(EGFP/V16 3A/S175G)是一种发光能力更强、更稳定的新型绿色荧光蛋白。为了获得大量高纯度的蛋白 ,将mut4EGFP基因插入原核表达载体 pTWIN1中 ,使之与几丁质结合域 (CBD) 内含肽 (intein)融合 ,获得原核表达质粒 pTWIN M 4。将 pTWIN M 4转化大肠杆菌BL2 1(DE3)plysS ,IPTG诱导后进行SDS PAGE电泳分析 ,结果显示 ,CBD intein mut4EGFP融合蛋白在BL2 1(DE3) plysS中获得高效表达并以可溶性蛋白的形式存在。进一步采用几丁质柱纯化系统对表达产物进行纯...
【关键词】绿荧光蛋白 突变体mut4EGFP 表达 纯化
【基金】国家自然科学基金项目 (3 9970 5 5 9)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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