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地衣芽孢杆菌α-耐高温淀粉酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

2004-02-25分类号:Q785

【作者】潘风光  宋德群  任洪林  艾永兴  柳增善
【部门】军需大学军事兽医系  沈阳农业大学  军需大学军事兽医系  军需大学军事兽医系  军需大学军事兽医系 吉林长春130062   辽宁沈阳110161   吉林长春130062   吉林长春130062   吉林长春130062
【摘要】地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)是产生具有重要工业生产价值的耐高温α -淀粉酶(α -amylase)的优良菌株。在提取地衣芽孢杆菌基因组DNA基础上 ,通过PCR方法克隆了耐高温淀粉酶的全长基因1539bp ,与pUCm -T载体连接转化入克隆菌DH5α中 ,经过酶切鉴定筛选出阳性的克隆菌 ,再提取质粒与表达载体pET-28a( +)酶切后连接转化入宿主菌DE3中 ,其阳性重组子在37℃1.0mmol·L-1IPTG诱导下 ,α -淀粉酶的基因得到了较好的表达。表达产物经SDS -PAGE鉴定 ,确定表达蛋白的相对分子量为63000左右 ,与理论推导的分子量相一致。
【关键词】地衣芽孢杆菌  耐高温淀粉酶  基因克隆  表达
【基金】
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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