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改进简并PCR法克隆盐生杜氏藻烯醇酶基因

2004-07-30分类号:Q78

【作者】白林含  乔代蓉  郑鸣  徐辉  李茜  蒋彦  杨志荣  曹毅
【部门】四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院   四川大学生命科学学院
【摘要】该文针对基因同源性克隆中存在的问题 ,采用改进简并PCR法对盐生杜氏藻具抗逆功能的烯醇酶基因 .改进后的同源引物简并度从 10 0 0倍以上降低至 10 0倍以下 ,利用RT PCR成功地扩增出一条 6 30bp的盐藻cDNA片段 ,该片段与其他物种的烯醇酶基因具有很高的相似性 .在此基础上进行 5’和 3’RACE获得了盐藻烯醇酶基因的全长cDNA ,其长度为 1734bp .序列分析表明 ,该基因与莱茵衣藻烯醇酶基因的相同性达 83% ,相似性达 89% ,且在进化上与莱茵衣藻的亲缘关系最近 .Southern杂交结果显示 ,该基因在盐藻中可能为单一拷贝
【关键词】盐藻  烯醇酶  基因克隆  简并PCR  RACE
【基金】国家转基因植物与产业化专项基金 (J0 0 A 0 0 8 0 9); “863”国家项目 ( 2 0 0 1AA2 12 161)资助
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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