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光敏生物素标记犬细小病毒核酸探针的制备及其应用

1993-12-31分类号:S852.655

【作者】孔繁德  陆承平
【部门】南京农业大学动物医学系  南京农业大学动物医学系 210014 厦门动植物检疫局 361012   210014
【摘要】将含有犬细小病毒2.0 kb DNA 克隆片段的重组质粒 pBI-264转化大肠杆菌 JF-803,扩增后用碱裂解法提取重组质粒,纯化后电泳,用冷榨法回收克隆片段。用光敏生物素分别标记重组质粒及克隆片段,制成重组质粒探针及克隆片段探针两种核酸探针,它们对犬细小病毒有相同的杂交特异性,检测灵敏度达 pg 水平,保存期至少8个月。检测25份犬粪样,阳性率为32%(8/25),而 HA-HI 试验为24%(6/25),两种方法的符合率为92%(23/25)。本试验从粪样直接提取病毒 DNA,用非放射性的光敏生物素标记探针检测,方法简便,可直接应用于兽医病毒学诊断。
【关键词】犬细小病毒  光敏生物素  核酸探针  病毒学诊断
【基金】
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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