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苏云金芽孢杆菌Vip3Aa10毒素结合肽的筛选及活性测定

2015-09-23分类号:S482.39

【作者】丁照鑫  王涵祎  曹利娟  郝艳同  申晓鸿  刘京国  
【部门】北京农学院生物科学与工程学院/农业部都市农业(北方)重点实验室  
【摘要】【目的】Vip3A是由苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在对数生长期产生并分泌到胞外的对鳞翅目昆虫有较广杀虫谱的毒素,其在敏感昆虫中肠上的结合受体尚未得到鉴定。利用噬菌体展示技术,论文试图从肽库中筛选到能与Vip3A毒素特异性结合的多肽,为研究Vip3A毒素的杀虫模式提供线索。【方法】将构建的p ET28a-Vip3Aa10表达质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,用亲和纯化的方法制备Vip3Aa10,并用胰蛋白酶活化和离子交换层析进一步纯化。以活化的Vip3Aa10毒素为诱饵,经“吸附-洗脱-扩繁”4轮条件逐渐严格的淘选,从噬菌体随机肽库中...
【关键词】苏云金芽孢杆菌  营养期杀虫蛋白  结合肽  筛选  活性分析
【基金】北京市自然科学基金(5112009); 北京市属高等学校高层次人才引进与培养计划(CIT&TCD20154044); 北京市教委面上项目(KM201310020001)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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