牛IL-2cDNA缺失突变的矫正及表达产物生物学活性测定
2003-11-30分类号:S852.4
【部门】南京农业大学动物医学院 南京农业大学动物医学院 南京农业大学动物医学院 南京农业大学动物医学院 上海市农业科学院畜牧兽医研究所 南京师范大学生命科学院 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095 上海20110 江苏南京210097
【摘要】根据GenBank中的牛IL 2基因序列 ,设计一对引物Pa和Pd ,以牛外周血淋巴细胞为材料 ,用RT PCR方法扩增得到牛IL 2cDNA ,测序发现在扩增产物的第 2 4 0位缺失了一个A碱基。采用重叠延伸剪接术 (SOE法 )向突变体定点插入该碱基 ,然后与表达载体连接 ,获得了正确的表达产物。经RT PCR检测证明 ,重组的牛IL 2蛋白具有较好的生物学活性 ,能诱导肿瘤坏死因子TNF α和干扰素IFN γ的产生。
【关键词】牛白细胞介素2(IL-2)基因 重叠延伸剪接术 定点突变 表达
【基金】上海市科技兴农重点攻关项目 (X2 0 0 10 8)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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