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马铃薯纺锤块茎类病毒RT-PCR检测及全序列分析

2003-12-30分类号:S435.32

【作者】吴志明  贾晓梅  谢晓亮  温春秀  田伟  张庆良
【部门】河北省农林科学院经济作物研究所  河北农业大学园艺学院  河北省农林科学院经济作物研究所  河北省农林科学院经济作物研究所  河北省农林科学院经济作物研究所  河北科润农业技术有限公司 河北石家庄050051   河北保定 071001   河北石家庄050051   河北石家庄050051   河北石家庄050051   河北石家庄 050051
【摘要】根据马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)基因序列设计合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,经RT PCR法扩增出全长的cDNA片段,结果从感病组织中扩增出与预期的360bp大小的目标片段,而健康组织无此扩增产物;将其克隆到质粒pGEM T载体上,进行全序列分析。结果表明,与国内外的报道相比较,核苷酸同源率高达98%以上。PCR产物克隆作为RT PCR反应的阳性对照,解决了毒源保存和传播的问题,为进一步进行抗PSTVd基因工程研究打下了良好基础。
【关键词】马铃薯纺锤块茎类病毒  反转录-聚合酶链式反应  检测  克隆  序列分析
【基金】
【所属期刊栏目】华北农学报
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