腰带长体茧蜂cDNA文库的构建
2003-08-31分类号:Q782
【部门】中国科学院上海生命科学院植物生理生态研究所 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室 中国科学院上海生命科学院植物生理生态研究所 上海200025 江苏南京210095 上海200025
【摘要】从寄生在亚洲玉米螟 (Ostriniafurnacalis)幼虫体内 6d的腰带长体茧蜂 (Macrocentruscingulum)胚胎中提取总RNA和mRNA ,用分离到的微量mRNA合成cDNA第 1链。通过长距离PCR扩增得到足够量的双链cDNA。将SfiⅠ酶切后并纯化的cDNA片段连接到经SfiⅠ酶切的噬菌体λTripIEX2上 ,并对噬菌体进行包装 ,建成cDNA的全长库。经大肠杆菌XL1 Blue平板检测 ,未扩增文库的滴度为 0 75× 10 6pfu·mL-1,克隆重组百分率为 96 77% ,扩增后文库的滴度为 0 5×10 10 pfu·mL-1。
【关键词】腰带长体茧蜂 胚胎 cDNA文库 PCR扩增
【基金】国家自然科学基金重点项目 (3 993 0 0 3 0 )
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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