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欧洲鳗鲡免疫球蛋白轻链基因的克隆及表达分析

2015-07-23分类号:S 965.223

【作者】冯建军  郭松林   林 鹏
【部门】集美大学水产学院/鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心/农业部东海海水健康养殖重点实验室  厦门 361021
【摘要】通过RTGPCR技术克隆欧洲鳗鲡(Anguillaanguilla)Ig轻链基因c DNA全长序列,命名为Aa Ig L,其全长为1016bp,开放阅读框为714bp,编码238个氨基酸.将该基因片段与p ETGhis载体连接构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达,其表达产物经SDSGPAGE和Westernblotting分析,结果表明新增的27ku蛋白条带与预期值相符,且与兔抗欧洲鳗鲡Ig M血清发生特异性显色反应,证实了Aa Ig L基因能够在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达;实时荧光定量PCR检测结果发现:Aa Ig L在欧洲鳗鲡各组织中均有表达,其中脾脏的表达量最高,肾脏和心脏...
【关键词】欧洲鳗鲡  免疫球蛋白轻链  原核表达  荧光定量PCR
【基金】国家自然科学基金项目 (31272685); 福建省教育厅项目 (JA11150); 福建省海洋与渔业厅项目 (201212140006); 集美大学科研基金项目(C60819)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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