【摘要】【目的】利用Red/ET系统结合rpsL反向筛选建立苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)晚期表达因子lef10点突变载体，为进一步研究AcMNPV lef10的功能提供参考。【方法】 利用Red/ET系统结合rpsL反向筛选BAC修饰系统对AcMNPV lef10进行点突变，由于lef10和必需基因vp1054有重叠，所以在敲除lef10时只能通过引进点突变使lef10失活，避免影响vp1054的正常表达。首先，构建rpsLAMP筛选盒，然后在野生型AcBacmid中引进点突变，方法是通过2次Red/ET重组：第1次重组在野生型AcBacmid lef10中引进rpsLAMP抗性筛选标记...