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鸡传染性法氏囊病病毒dsRNA的提纯与应用

2002-08-30分类号:S852.659.4

【作者】孙建和  陆苹  赵渝  李晖
【部门】上海交通大学农学院生物技术研究所  上海交通大学农学院生物技术研究所  上海交通大学农学院生物技术研究所  上海交通大学农学院生物技术研究所 上海201101   上海201101   上海201101   上海201101
【摘要】用传染性法氏囊病病毒 (IBDV)攻击 4周龄的非免疫鸡 ,以超速离心法从感染鸡法氏囊组织中分离、纯化IBDV ,应用蛋白酶K消化和Trizol(异硫氰酸胍 -酚 -氯仿法 )处理 2种方法从纯化的IBDV中抽提dsRNA。通过低熔点琼脂糖割胶 -酚 -氯仿抽提可获得纯化的dsRNA ,研究发现应用蛋白酶K消化获得的纯化RNA产量高 ,用其作模板进行RT -PCR可扩增IBDV基因组全长cDNAA片段和B片段、VP2基因和VP2 - 4 - 3基因。
【关键词】传染性法氏囊病病毒(IBDV)  dsRNA提纯  蛋白酶K消化法  Trizol抽提法  RT-PCR
【基金】上海市科学技术发展基金资助项目 (0 1JC14 0 3 4)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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