鲢生长激素cDNA表达载体构建及在大肠杆菌中的表达
2002-06-30分类号:Q785
【部门】中国水产科学研究院黄海水产研究所 BiocenterofUniversityWuerzburg 农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室 山东青岛266071 Wuerzburg97074
【摘要】应用RT—PCR技术从白鲢垂体mRNA中扩增出GH全长cDNA片段 ,长度 1.2kb。将 1.2kb白鲢GHcDNA克隆到载体质粒pBluescriptKSII +(pBSKSII +)中 ,构建了pBS -scGHcDNA克隆 ;通过含有NdeI酶切位点的特异引物扩增出不含信号肽序列的cDNA片段 ,将其重组到pRSET5b载体质粒中 ,构建了白鲢GHcDNA表达质粒pRSET -scGH。将此表达质粒转化BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,经IPTG诱导后 ,在转化的大肠杆菌中检测到GH蛋白的存在。Western印迹表明该蛋白带与草鱼GH单克隆抗体具有强烈的免疫反应。
【关键词】鲢 生长激素cDNA 表达载体 大肠杆菌
【基金】农业部“九五”重点渔业科技项目 (渔 95 -B -96 -0 7-0 3)
【所属期刊栏目】水产学报
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