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莱茵衣藻LRR-1蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

2024-08-21分类号:Q78

【作者】冯雳   卢静   魏思雯   胡长峰   弋美霞   罗仕超
【部门】江汉大学医学部  江汉大学持久性有毒污染物环境与健康危害湖北省重点实验室  江汉大学生命科学学院  
【摘要】为深入研究富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)在机体先天免疫过程中的作用机理,以莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)为模式生物,通过生物信息学预测分析CrLRR-1蛋白的二级结构、亲水性及免疫原性等理化性质,人工设计并合成特异性肽段,与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联后免疫新西兰白兔。结果显示:采用间接ELISA法测定抗血清效价达到1∶512 000,将抗血清依次经Protein A和抗原亲和纯化后得到CrLRR-1蛋白多克隆抗体;利用免疫印迹与免疫荧光检测制备的抗体,该抗体可特异性识别莱茵衣藻内源LRR-1蛋白,且CrLRR-1蛋白主要定位于细胞膜。结果表明,成功制备CrLRR-1蛋白多克隆抗体。
【关键词】莱茵衣藻  富亮氨酸重复序列  先天免疫  防御反应  多克隆抗体
【基金】国家重点研发计划(2020YFA0907400);; 国家自然科学基金项目(32170702)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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