【摘要】【目的】拟通过构建高效杀虫枯草芽孢杆菌YZ-1的转座突变体库，从中筛选出高产表面活性素的突变体菌株，为后续YZ-1的表面活性素合成调控机制解析和开发利用提供前期材料。【方法】利用携带转座子TnYLB-1和温敏型复制蛋白的穿梭载体pMarA转化YZ-1，通过50 ℃温度诱导转座子转座、抗性培养复筛以及特异性PCR扩增验证，构建YZ-1菌株的转座突变体库。组合使用血平板法初筛、溴百里香酚蓝比色法复筛及HPLC定量检测，从突变体库中筛选表面活性素合成显著增强的突变体。【结果】通过自然转化成功地将pMarA质粒导入枯草芽孢杆菌YZ-1中，获得含有3000株转座突变子的YZ-1突变体库，从中筛选出11株表面活性素合成增强的候选菌株。HPLC检测显示与YZ-1野生型相比，表面活性素合成增强和相似的突变体有5株（M1、M6、M7、M8及M9），显著下降有6株（M2、M3、M4、M5、M10及M11），其中表面活性素产量最高的M8突变体为282.4 mg/L较野生型增加了13.7%，而最低的M2菌株为47.53 mg/L，较野生型下降了80.9%。【结论】增设抗性复筛培养可提高YZ-1突变体库的正确率。基于血平板培养和溴百里香酚蓝比色的高通量筛选与HPLC定量检测的YZ-1表面活性素增强型突变体筛选结果不理想，还需进一步改进。