掌叶覆盆子RcF3H基因克隆及表达分析
2024-09-20分类号:S567.19
【部门】浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室 浙江中医药大学药学院/浙江省药食植物活性成分与健康国际科技合作基地/浙江省中药资源创新与转化中医药重点实验室
【摘要】【目的】黄烷酮3-羟化酶(F3H)是植物类黄酮合成的关键酶。研究掌叶覆盆子Rubus chingii RcF3H基因与类黄酮代谢的关系并分析其生物学功能,可为进一步探究RcF3H在掌叶覆盆子类黄酮物质积累过程中的作用机制提供参考。【方法】在掌叶覆盆子中克隆RcF3H基因,并进行生物信息学分析,包括理化性质、同源性比对、系统进化树和启动子顺式作用元件等。检测RcF3H基因在不同组织器官、果实生长时期以及在外源茉莉酸甲酯(MeJA)诱导下的表达水平。【结果】2-酮戊二酸依赖性双加氧酶(2-ODD)家族基因RcF3H位于第一条染色体,片段长度为1 098 bp,由1个外显子构成,共编码了365个氨基酸。RcF3H属于亲水性稳定蛋白,亚细胞预测定位在细胞质上。RcF3H蛋白的二、三级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲组成,与插田泡Rubus coreanus及拟南芥Arabidopsis thaliana等双子叶植物的亲缘关系最近。RcF3H基因启动子区域含有多个顺式作用元件,功能集中于响应激素和应对胁迫等方面。RcF3H基因在掌叶覆盆子果实中表达量较高,有明显的组织特异性。RcF3H基因表达变化与类黄酮物质在掌叶覆盆子果实中积累规律一致,并在100μmol·L-1 MeJA处理下表达量上升,推测其是促进类黄酮合成的关键酶。【结论】RcF3H响应外源MeJA刺激,并可能作为掌叶覆盆子类黄酮生物合成的正向调节因子,影响类黄酮的积累。图8表2参28
【关键词】掌叶覆盆子 黄烷酮3-羟化酶 基因克隆 表达分析 类黄酮
【基金】浙江省农业(中药材新品种选育)新品种选育重大科技专项(2021C02074-3);; 浙江省卫生创新领军人才计划项目;; 国家青年岐黄学者项目
【所属期刊栏目】浙江农林大学学报
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