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灰毡毛忍冬花器官发育相关LmSOC1基因克隆及表达分析

2024-06-13分类号:S567.79

【作者】龙丽君   马英姿   曾慧杰   李昌珠   张岗   刘思思   李依民
【部门】湖南省林业科学院经济林研究所  中南林业科技大学生命科学与技术学院  陕西中医药大学陕西省中医药管理局“秦药”研发重点实验室  陕西中医药大学省部共建特色秦药资源研究开发国家重点实验室(培育)  
【摘要】【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO 1),对其进行生物信息学和表达模式分析,为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据,筛选到开花调控基因LmSOC1的Unigene序列并克隆全长cDNA序列,通过生物信息学分析和实时荧光定量PCR技术分析编码蛋白特性和不同品种中LmSOC1基因的表达特异性,最后将LmSOC1基因插入到原核表达质粒载体pTOPO-D1中,并在表达宿主BL21(DE3)中进行蛋白表达。【结果】LmSOC1基因包含645 bp的ORF区,LmSOC1蛋白不含信号肽、无跨膜区,为稳定的亲水性蛋白。系统进化树分析表明,LmSOC1蛋白与黄花蒿、榴莲、可可等的SOC1蛋白亲缘关系更近。实时荧光定量PCR分析表明,在2个花蕾型灰毡毛忍冬品种的花蕾和叶片中均检测到LmSOC1基因的表达,而叶片中表达量明显高于花蕾。同时,在早期花蕾中LmSOC1基因的表达量高于晚期花蕾,在‘金翠蕾’品种中这一表达差异极显著(P <0.01)。最后成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出重组蛋白。【结论】通过对LmSOC1基因的克隆和表达分析发现,该基因可能在灰毡毛忍冬花器官发育过程中发挥重要作用,为进一步研究该基因在植物花发育中的生物学功能奠定了基础。
【关键词】灰毡毛忍冬  MADS-box  LmSOC1  基因克隆  表达分析  原核表达
【基金】湖南省自然科学基金面上项目(2022JJ30326);; 木本油料资源国家重点实验室建设项目(2022PT1004)
【所属期刊栏目】中南林业科技大学学报
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