标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

自然感染绵羊肺腺瘤病毒羊肺组织线粒体自噬分子表达分析

2024-06-05分类号:S858.26

【作者】梁浚哲   段续接   杜晓悦   张良   李慧萍   刘淑英
【部门】内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物临床诊疗技术重点实验室/内蒙古自治区基础兽医学重点实验室  呼  
【摘要】为分析自然感染绵羊肺腺瘤病毒(Jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)羊肺组织中线粒体的质量及自噬相关蛋白表达的变化,本研究将自然感染JSRV羊的肺组织作为研究对象,利用病理组织学、PCR和免疫组化法对自然感染JSRV羊肺组织进行鉴定。利用透射电镜技术观察病羊肺组织中线粒体形态结构变化,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(WB)检测感染组羊肺组织中线粒体相关因子线粒体外膜蛋白20(Outer membrane translocase 20,TOMM20)、线粒体内膜蛋白(Inner membrane translocase 23,TIMM23)、热休克蛋白60(Heat shock proteins 60,HSP60)的mRNA和蛋白水平的相对表达量,利用WB检测病羊肺组织线粒体蛋白中自噬相关因子Beclin1、LC3和选择性自噬受体p62蛋白水平的相对表达量。结果表明:1)PCR扩增的目的条带与JSRV env预期扩增片段大小一致。光镜下可见肺组织中肺泡Ⅱ型上皮细胞呈乳头状生长,且伸入肺泡中,同时免疫组化结果显示在增生的肺泡Ⅱ型细胞中检测到JSRV Env大量表达,而阴性对照组未检出。2)与健康对照组相比,透射电镜观察到感染组羊组线粒体大量损伤,并且出现双层膜结构的线粒体自噬体包裹损伤的线粒体,TOMM20、TIMM23和HSP60的mRNA相对表达水平和蛋白相对表达水平(P<0.01)均极显著下降。3)自噬因子Beclin1(P<0.05)和LC3(P<0.01)蛋白相对表达水平显著升高,p62相对表达显著下降(P<0.001)。综上,本研究发现自然感染JSRV羊肺组织中线粒体损伤严重并出现线粒体自噬现象,为JSRV的致病机制提供新的研究方向。
【关键词】绵羊肺腺瘤病毒  绵羊肺组织  线粒体损伤  线粒体自噬
【基金】国家自然科学基金项目(32072819、32360863);; 内蒙古科技重大专项(2021ZD0010);; 内蒙古草原英才创新团队项目(20151031);; 内蒙古教育厅创新团队项目(NMGIRT2412);; 牛羊疫病防控与发育工程创新团队资助项目(RZ2200001130);; 研究生科研创新资助项目(B202310722)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
文献传递