【摘要】【目的】通过克隆鉴定梅山猪和杜洛克猪卵泡期第4天M2卵泡中差异表达的lncRNA-ALDBSSCT0000005583，分析其在猪颗粒细胞与miRNAs表达量的相关性，为探究lncRNA调控miRNA在母猪卵泡发育过程中的作用提供理论依据。【方法】对课题组前期在梅山和杜洛克M2卵泡中筛选出的差异表达lncRNA-ALDBSSCT0000005583，进行RT-qPCR验证，并利用RACE克隆其全长序列；根据编码潜力评估工具CPAT、CPC对该lncRNA的编码能力进行预测，原核表达试验进一步鉴定其编码能力；核质分离试验对lncRNA-ALDBSSCT0000005583进行亚细胞定位，RT-qPCR检测其在各组织中的表达水平；利用miRBase网站查找猪的miRNA数据库，结合RNAhybrid、miRanda在线软件预测与lncRNA-ALDBSSCT0000005583有相互作用的物种间保守miRNA，使用TargetScan和miRanda预测与lncRNA-ALDBSSCT0000005583具有相互作用miRNA的靶基因，并对其靶基因进行GO富集和KEGG信号通路分析；通过过表达以及干扰lncRNA验证其对miRNA表达量的影响。【结果】lncRNAALDBSSCT0000005583在杜洛克猪M2卵泡中的表达量显著高于梅山猪，lncRNA 5'RACE和3'RACE片段大小为569 bp和546 bp，测序分析表明lncRNA-ALDBSSCT0000005583大小为588 bp。生物信息学预测其编码潜能较低，同时原核表达试验结果进一步证明其不编码蛋白质。组织表达谱分析表明，lncRNA-ALDBSSCT0000005583在肾上腺、脾肝和卵巢中表达量较高，在下丘脑和心脏中的表达量较低，亚细胞定位结果显示该lncRNA主要存在于细胞质中。生物信息学分析后共筛选出9个物种间保守的miRNA与lncRNA-ALDBSSCT0000005583具有潜在的相互作用，其中有两个与卵巢发育相关的miRNA:miR-193a-5p、miR-361-3p;KEGG和GO富集分析显示miR-193a-5p、miR-361-3p的靶基因与系统进程和细胞与细胞信号传导等生物学过程有关，并显著参与到催产素、Ras、NF-κB、促性腺激素释放激素分泌等通路。随后在颗粒细胞中过表达lnc RNA-ALDBSSCT0000005583，经RT-qPCR发现miR-193a-5p、miR-361-3p的表达量均显著下调（P<0.05)，但干扰lncRNA-ALDBSSCT0000005583后无显著影响。【结论】lncRNA-ALDBSSCT0000005583是一个不具备编码蛋白质能力的lncRNA，在梅山与杜洛克猪中等卵泡间表达量有极显著差异，在肾上腺、脾肝和卵巢中表达量较高，主要存在于颗粒细胞的细胞质中，可能与miR-193a-5p、miR-361-3p相互作用，从而参与猪卵巢颗粒细胞的发育过程。