基于细胞培养基中血清浓度优化探索赭曲霉毒素A对HK-2细胞的毒性作用
2024-05-17分类号:O657.63;S859.8
【部门】上海海洋大学食品学院 上海市农业科学院农产品质量标准与检测技术研究所
【摘要】[目的]本研究旨在探讨细胞培养基中添加不同浓度血清对赭曲霉毒素A (ochratoxin A, OTA)毒性的影响,以期更深入了解OTA的毒性,同时为其他OTA体外毒性研究提供重要参考价值。[方法]首先测定了OTA对人肾皮质近曲小管上皮细胞(human proximal tubule-derived epithelial cells, HK-2)细胞活力的影响,同时利用超高效液相色谱串联质谱技术检测了细胞上清液中OTA水平以间接反应细胞对OTA的摄入量,最终分析培养基中不同浓度血清对OTA毒性的影响。[结果]细胞培养基中添加5%浓度血清在48 h内不会影响细胞活力,可以作为细胞正常培养条件,添加2%浓度血清在36 h不会影响细胞活力,可以作为配制OTA工作液的细胞处理条件。基于优化的细胞培养及处理条件,OTA对HK-2细胞活力的影响结果表明,OTA抑制细胞活力呈现时间和剂量依赖性,OTA处理HK-2细胞12、24、36 h的IC_(50)分别为39.29、6.28和2.72 μmol·L~(-1)。同时OTA可以时间依赖性极显著提高细胞释放LDH,损伤细胞膜的完整性(P<0.01)。[结论]细胞培养基中添加不同浓度血清可影响OTA的毒性,且血清浓度越高,对OTA毒性影响越大。其中,当使用2%血清浓度的培养基配制OTA工作液时,可在不影响细胞活力的前提下最大限度降低血清浓度对OTA毒性的影响。
【关键词】赭曲霉毒素A 血清浓度 HK-2细胞 超高效液相色谱-串联质谱技术
【基金】上海主要地产鲜食果蔬中多重危害因子复合污染风险评估(沪农科创字(2021)第3-2号)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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