【摘要】【目的】三蕊兰（Neuwiedia singapureana）为兰科拟兰亚科（Apostasioideae）三蕊兰属（Neuwiedia）植物，是兰科中最原始的类群之一。开展三蕊兰可培养内生真菌多样性及其促生潜能研究，可为发掘海南地区三蕊兰内生真菌资源提供科学依据。【方法】以分布于海南吊罗山自然保护区野生三蕊兰为材料，通过分离培养，结合ITS测序及分析开展三蕊兰根内可培养真菌分离鉴定，并对其溶磷能力进行检测。将分离获得的内生真菌与铁皮石斛（Dendrobium officinale）和多花脆兰（Acampe rigida）原球茎进行共培养，检测其对2种兰科植物生长的影响。【结果】在光学显微镜下可明显观察到三蕊兰根细胞内分布的真菌菌丝。共获得三蕊兰根内生真菌24个OTUs，分属于9科14属，木霉属（Trichoderma）真菌分离概率最高；Nectriaceae科5个属(如Cylindrocarpon和Gliocephalotrichum等)真菌分离率次之。其中5株内生真菌具有不同程度的溶磷能力，为Apiotrichum sp.（Neu242），Cylindrocarpon spp.（Neu83和Neu154），Gliocladiopsis sp.（Neu245），和Mucor sp.（Neu123）属真菌。菌株Mucor sp. Neu123和Apiotrichum sp. Neu242对铁皮石斛和多花脆兰幼苗生长具有显著促进作用。【结论】三蕊兰根内具有丰富的可培养内生真菌，筛选鉴定出具溶磷能力的兰科促生真菌，可为兰科植物的人工繁育提供促生菌株资源，也为兰科菌根共生磷营养机制研究奠定基础。