【摘要】【目的】鉴定辣木中MoGAD基因，并对其进行克隆、生物信息学分析和表达水平分析，为探究辣木MoGAD基因的功能与γ-氨基丁酸（GABA）生物合成的关系奠定了基础。【方法】以拟南芥（NP＿197235.1）和葡萄（XP＿002285268.1）GAD蛋白序列为参考，通过本地BLAST方法，利用TBtools软件在辣木转录组数据中挖掘MoGAD家族基因，采用PCR技术对其进行克隆，并通过生物信息学在线分析网站和分子对接技术分析MoGAD蛋白的理化性质和催化活性位点，采用实时荧光定量RT-qPCR技术分析MoGAD基因在不同组织中的表达水平。【结果】在转录组数据中挖掘到4个MoGAD基因并成功对其进行克隆，测序的CDS区长度分别为：1494 bp、1212 bp、1470 bp和942 bp；MoGAD1、MoGAD3和MoGAD4蛋白不存在跨膜结构域，属于膜外蛋白。其中MoGAD2蛋白序列在第5～27和60～82氨基酸位置存在跨膜结构，此段序列编码蛋白为分泌蛋白；系统发育分析显示MoGAD1基因家族所在分枝基因Motif数量最多；分子对接表明4个MoGAD蛋白存在磷酸吡哆醛（PLP）和L-谷氨酸结合位点，且每个蛋白有多个氨基酸残基与PLP，L-谷氨酸形成氢键；荧光定量分析显示MoGAD1和MoGAD2基因在嫩叶、成熟叶和花中的表达量显著高于MoGAD3和MoGAD4基因，但这些基因在茎中表达量较低，推测MoGAD酶主要参与辣木叶部位GABA的生物合成。【结论】文章成功克隆了辣木的MoGAD基因，并分析其编码蛋白的理化性质及与底物结合的功能活性位点，为进一步研究MoGAD基因的功能提供了理论依据。