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猪CRYBB2基因启动子的克隆、活性及转录调控元件分析

2023-12-28分类号:S828

【作者】龙熙   袁晓   陈力   吴平先   张亮   潘红梅   郭宗义   柴捷
【部门】重庆市畜牧科学院  农业部养猪科学重点实验室  
【摘要】旨在初步分析猪CRYBB2的启动子活性以及转录调控元件。利用生物信息学分析、PCR扩增、基因克隆、细胞转染、双荧光素酶活性分析等方法,获得了CRYBB2启动子区域的序列特征,构建了不同片段长度的CRYBB2启动子区的双荧光素酶报告基因载体并分析了其荧光素酶活性,进而确定了CRYBB2的核心启动子区域以及关键的调控区域,最后还预测了关键调控区域的转录因子及其结合位点。结果表明,CRYBB2候选启动子区可能包含4个核心启动子以及1个CpG岛,-52~-3 bp可能为CRYBB2基因的核心启动子区域,-505~-19 bp为CRYBB2基因启动子的关键调控区域,且发挥正向调节作用,而-2 060~-505 bp不存在任何对CRYBB2基因启动子活性有影响的调控元件;CRYBB2启动子的关键调控区域包含多个潜在的转录因子结合位点,如TBP、NFIA、FOXP1、NKX2-8、KLF4、Tcf3、Crx、SNAI3、Rfx1和CREB1等。为进一步研究猪CRYBB2的表达机制奠定了基础。
【关键词】猪  CRYBB2  启动子  转录活性  转录因子
【基金】重庆市科研院所绩效激励引导专项(21530);; 国家重点研发计划项目(2021YFD1301105)
【所属期刊栏目】华北农学报
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