【摘要】【目的】对甜瓜采后主要致腐微生物进行分离鉴定，并筛选出防腐效果最佳的拮抗菌株，丰富甜瓜采后保鲜拮抗菌资源。【方法】利用组织块分离法在腐烂的甜瓜果实中分离致腐菌，梯度稀释法从甜瓜种植地土壤分离拮抗菌，通过平板对峙法筛选出拮抗作用较强的生防菌，并通过形态学观察、生理生化测定、生物学鉴定确定其种属，测定拮抗菌对菌丝生长及分生孢子萌发的作用，明确拮抗菌对致腐菌的防治效果。【结果】本研究分离出1株主要病原菌CH-3，通过对ITS、tef和tub基因序列进行BLAST 比对及系统发育分析，结合菌落形态特征观察，病原菌CH-3鉴定为尖孢镰刀菌。从甜瓜种植地土壤中分离得到67株细菌，通过拮抗试验得到3株抑菌活性很强的拮抗菌，分别为BG-1、BG-2和BG-3，选取抑菌效果更好的BG-2作为供试菌株，结合生理生化测定、菌落和菌体形态特征观察及16S rDNA、gyrB和rpoB基因序列分析结果，明确拮抗菌BG-2为贝莱斯芽孢杆菌。致病性测定结果表明，致腐菌CH-3对甜瓜有致病性，拮抗菌BG-2对甜瓜致腐菌尖孢镰刀菌CH-3孢子萌发、菌丝生长的相对抑制率分别为90.00%、60.11%。【结论】获得1株拮抗效果最佳的拮抗菌BG-2，鉴定为贝莱斯芽孢杆菌，分离到1株甜瓜主要致腐菌CH-3，鉴定为尖孢镰刀菌。贝莱斯芽孢杆菌BG-2对尖孢镰刀菌CH-3有较强的拮抗作用，致腐菌CH-3对甜瓜有致病性，拮抗菌BG-2能有效抑制甜瓜致腐菌尖孢镰刀菌CH-3孢子萌发、菌丝生长，且拮抗菌浓度越高对孢子萌发的抑制效果越好。在甜瓜采后贮藏及生物保鲜中具有潜在的应用价值。