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靶向鸡糖皮质激素受体基因的microRNA预测与鉴定

2024-01-30分类号:S831

【作者】赵敏蝶   刘杰   赵茹茜
【部门】南京农业大学动物医学院/农业农村部动物生理生化重点实验室  
【摘要】[目的]本文旨在预测和筛选靶向调控鸡糖皮质激素受体(Glucocorticoid Receptor, GR)表达的microRNAs。[方法]用TargetScan、PicTar和miRDB三种软件分别预测靶向鸡GR 3'UTR microRNAs并取交集;构建包含鸡GR 3'UTR的重组质粒及突变质粒,通过双荧光素酶实验鉴定microRNA和鸡GR 3'UTR的靶向性;用TargetScan和miRDB两种软件分别预测候选microRNAs的靶基因,用DAVID软件对预测出的共同靶基因进行GO功能分析;Western blot检测分别过表达候选microRNAs对鸡DF1细胞 GR蛋白表达的影响。[结果]miR124-3p、miR142-3p、miR204/211、miR183、miR18-5p和miR181a/181b是三种软件预测靶向GR 3'UTR的交集microRNA;双荧光素酶实验的结果表明miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合GR 3'UTR;两种软件预测三个候选microRNA的靶基因中都有GR且富集分子功能不同;在DF1细胞中过表达三个候选microRNA后,miR142-3p和miR204/211显著降低GR蛋白水平的表达(P < 0.05)。[结论] miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合鸡GR 3'UTR且miR142-3p和miR204/21可以降低鸡DF1细胞中GR蛋白的表达水平。
【关键词】鸡  糖皮质激素受体  microRNA
【基金】国家自然科学基金(32272962,31972638);; “十四五”国家重点研发计划(2022YFD1300401)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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