【摘要】脂质体转染是分子生物学中研究基因功能和基因表达调控的常规手段。然而，在海水硬骨鱼细胞中，脂质体转染效率低下且很难通过转染后直接筛选的方式获得稳转细胞。本研究以pminiTol2为模板，在末端反向重复序列中间添加了CMV启动子、EGFP荧光蛋白、新霉素抗性基因等功能区域，构建了CMV-EGFP-pminiTol2重组载体。CMV-EGFP-pminiTol2和pCS-TP质粒经脂质体包裹共转染至牙鲆(Paralichthys olivaceus)卵巢颗粒细胞后，仅需2～3周的新霉素(G418)筛选即可获得稳定转染的细胞。本实验首次探究了利用Tol2转座子系统快速筛选获得牙鲆稳转细胞的方法，其研究成果可应用于牙鲆分子生物学研究，并为其他硬骨鱼类稳转细胞构建及筛选提供新的思路。