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弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析

2023-12-20分类号:S852.7

【作者】李响   张小涵   李美琪   陈冉   冯颖   李林   桑晓宇   杨娜
【部门】沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点实验室  辽宁成大生物股份有限公司  
【摘要】为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示,Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变;间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达;纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力,同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体(>1∶25 600)。以上结果表明,通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。
【关键词】弓形虫  MIC1蛋白  杆状病毒系统  活性分析
【基金】国家自然科学基金项目(31902297;31672546;32072891);; 辽宁省教育厅项目(LJKZ0673;LSNQN202003);; 沈阳市中青年科技创新人才支持计划项目(RC 210291)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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