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布氏鲳鲹microRNA-novel_176组织表达及靶基因验证

2024-01-17分类号:S917.4

【作者】宋飞彪   施立萍   郑达   梁欢   纪馨馨   佟金凤   卜邵洋   孙俊龙   骆剑
【部门】海南大学海洋生物与水产学院海南大学三亚南繁研究院海南省水产种业工程研究中心海南省院士团队创新中心  
【摘要】分了研究microRNA在布氏鲳鲹性腺发育中的作用,本研究以前期发现的性腺发育关键miR-novel_176为对象,采用荧光定量PCR、荧光原位杂交、双荧光素酶报告基因、RNA干扰和过表达等实验手段,系统验证其与靶基因的调控关系及潜在的生物学功能。结果显示,miR-novel_176在布氏鲳鲹各组织中均表达,在卵巢中的表达量高于精巢,但差异不显著;miR-novel_176主要定位于卵巢细胞质,阳性信号主要位于卵母细胞和颗粒细胞中,在精巢中的支持细胞和精原细胞也显示出微弱杂交信号;miR-novel_176与esr2和foxo3基因的3'-UTR互补,显著抑制荧光素酶的活性;细胞转染novel_l76-antagomir和novel_l76-agomir后,miR-novel_176的表达水平显著下调和上调,靶基因foxo3和esr2的表达水平发生显著相反的表达变化。研究表明,miR-novel_176的靶基因为esr2和foxo3,miR-novel_176能够特异互补3'UTR区域进而调控其表达水平。本研究为进一步揭示miRNA在鱼类性腺发育中的功能提供了新证据,同时为布氏鲳鲹性腺发育研究提供了新的候选miRNA。
【关键词】布氏鲳鲹  miRNA  性腺发育  细胞定位  RNA干扰  过表达
【基金】海南省自然科学基金(322QN236);; 国家自然科学基金(32160862);; 国家重点研发计划(2022YFD2400504)
【所属期刊栏目】水产学报
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