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新麦草YUCCA基因克隆及其表达特性分析

2024-01-05分类号:S543.9

【作者】任晓敏   云岚   艾芊   李珍   赵乔   石凤翎
【部门】内蒙古农业大学草原与资源环境学院  草地资源教育部重点实验室  中国科学院深圳先进技术研究院  
【摘要】【目的】克隆新麦草分蘖关键基因YUCCA并明确其表达特性,为该基因功能验证和育种利用奠定基础。【方法】以不同分蘖类型的新麦草分蘖节为材料,采用PCR法克隆新麦草YUCCA基因并进行同源序列比对,构建1300-c YFP-YUCCA过表达载体,利用烟草瞬时转染及蛋白质印迹法分析新麦草YUCCA蛋白的表达位置及表达情况,通过RNA-Seq数据及q RT-PCR分析验证YUCCA基因的相对表达量。【结果】成功克隆了新麦草YUCCA基因全长,大小为1 336 bp,最大阅读框为1 236 bp,并成功构建了1300-c YFP-YUCCA过表达载体。多序列比对结果显示,新麦草YUCCA主要与麦类作物的亲缘关系较近。表达特性分析发现,YUCCA基因在多分蘖型新麦草中的相对表达量远低于少分蘖型新麦草;与叶、根等组织相比,YUCCA基因在分蘖节中的相对表达量最高。烟草瞬时转化和蛋白质印迹法分析均显示,YUCCA蛋白可以正常表达,其亚细胞定位于细胞质中。【结论】YUCCA基因在调控新麦草分蘖中起下调作用,可用于后续YUCCA基因功能的研究。
【关键词】新麦草  YUCCA  过表达载体  亚细胞定位  基因克隆
【基金】内蒙古自治区自然科学基金重点项目(2023ZD07);; 内蒙古自治区种业创新重大示范工程“揭榜挂帅”项目(2022-JBGS0040)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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