兰州鲇NPY基因的克隆和表达分析
2023-10-28分类号:S917.4
【部门】喀什大学生命与地理科学学院 宁夏回族自治区水产研究所(有限公司) 新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室 甘肃农业大学动物科学技术学院 宁夏渔业工程技术研究中心 宁夏渔业科技院士工作站
【摘要】针对兰州鲇人工驯食转化率、苗种培育成活率低等问题,为利用基因编辑技术创制和培育易驯食兰州鲇新种质,开展了兰州鲇神经肽Y基因(NPY)的克隆及其表达分析研究。结果表明:兰州鲇NPY基因cDNA序列全长为775 bp,包括288 bp的开放阅读框,编码95个氨基酸,含有1个跨膜螺旋和1个信号肽胰腺激素类识别结合位点。兰州鲇NPY蛋白序列与南方鲇的一致性最高,为98.95%。荧光定量PCR检测发现NPY mRNA在脑组织中表达量最高,其次是下丘脑,肌肉中表达量最低。不同年龄雄性各组织中NPY mRNA表达水平均高于雌性;且雌雄性别组间均表现出随年龄的增长NPY mRNA表达下降的特征。利用原位杂交技术进行脑组织细胞定位发现,脑细胞中NPY主要在细胞质中表达;不同部位脑组织中主要以前脑的视前区、视顶盖和脑垂体,小脑的豆状核区域以及延脑的尾状核区域表达量较丰富。进一步进行饥饿补偿验证发现,饥饿可引起脑组织NPY表达量显著升高,摄食后NPY表达量显著下降。上述结果表明,NPY基因可能在兰州鲇生长和摄食过程中都具有重要作用,可作为对后续功能基因进行编辑的重要验证并创制新种质,对加快兰州鲇良种新品种选育具有重要的理论意义和技术支撑作用。
【关键词】兰州鲇 NPY基因 生物信息学 基因克隆 原位杂交 组织表达
【基金】国家重点研发计划项目(2018YFD0901202);; 宁夏重点研发计划项目(2017BN06);; 农业农村部财政专项(HHDC-2022-02);; 2022年自治区重点研发计划黄河流域生态环境保护与高质量发展科技支撑专项
【所属期刊栏目】华北农学报
文献传递