青鳉精巢gdnfa与gdnfb的细胞表达模式及视黄酸和11-酮基睾酮对其差异调控作用
2023-11-22分类号:S917.4
【部门】西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室西部(重庆)科学城种质创制大科学中心 成都康诺行生物医药科技有限公司 贵州宏财聚农投资有限责任公司
【摘要】为探究青鳉胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)在精巢中的细胞表达模式,及视黄酸(retinoic acid,RA)和11-酮基睾酮(11-ketotestosterone,11-KT)对其表达调控作用,本研究通过荧光原位杂交(fluorescent in situ hybridization,FISH)检测了青鳉Gdnf的两个复制基因(即gdnfa与gdnfb)在精巢中的细胞表达模式,并通过实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative-polymerase chain reaction,qRT-PCR)、5’端上游序列转录活性分析等从组织、细胞及分子水平探究了精巢分化发育重要调控因子RA和11-KT对两者的表达调控作用。结果显示,在精巢中,gdnfa主要表达于体细胞,而gdnfb除表达于体细胞外,在生殖细胞中也有明显表达。不同浓度RA和11-KT处理体外培养的青鳉精巢组织及其传代培养体细胞MTS1,结果表明,两者均可显著下调gdnfa的表达,而上调gdnfb的表达。分别用gdnfa与gdnfb不同截短5’端上游序列的荧光素酶报告载体转染MTS1,结果显示,RA处理可降低gdnfa的多个截短5’端上游序列荧光素酶活性,而增强gdnfb的多个截短5’端上游序列荧光素酶活性,11-KT处理的结果与此基本相似。综上,青鳉gdnfa与gdnfb在精巢中具有差异的细胞表达模式,同时两者在组织、细胞及分子水平均受到了RA和11-KT的差异化调控。本研究深化了我们对于鱼类Gdnf两个复制基因的细胞表达模式及其调控的深入认识,为其进一步生物学功能研究奠定了重要基础。
【关键词】青鳉 胶质细胞源神经营养因子 视黄酸 11-酮基睾酮 精巢 体细胞
【基金】国家自然科学基金(31972776,32172969,31972778,32172953);; 重庆市自然科学基金 (cstc2020jcyj-msxmX1045)
【所属期刊栏目】水产学报
文献传递