【摘要】使用维生素C(V_C)处理猪睾丸(ST)细胞，探究其促进ST细胞增殖活力的作用机制，为促进雄性动物生殖系统发育提供依据。通过检测不同浓度V_C在不同处理时间下对ST细胞增殖活力的影响以确定V_C的最佳作用条件，并检测V_C最佳作用条件下对ST细胞增殖活力、细胞内活性氧(ROS)含量、细胞凋亡、细胞周期的影响；根据RNA-seq测序数据筛选V_C试验组(采用250μmol·L~(-1) V_C处理ST细胞72 h)与对照组(采用完全培养基处理ST细胞72 h)ST细胞的差异表达基因，并进行基因本体(GO)功能注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果表明：(1)用250μmol·L~(-1) V_C处理72 h极显著提高了ST细胞增殖活力(P<0.01),且效果最佳；(2)与对照组相比，V_C试验组极显著降低了ST细胞内ROS含量、细胞凋亡比例及G0/G1期的细胞比例(P<0.01),同时极显著提高了S期的细胞比例(P<0.01);(3)根据RNA-seq测序数据共筛选出1 668个差异表达基因，包括1 052个上调基因、616个下调基因；(4)GO功能注释和KEGG富集分析显示，差异表达基因多富集在细胞周期、细胞活力、细胞发育、催化活性等生物学过程中，其中，与细胞增殖相关的显著性富集通路包括黏附斑激酶信号通路、FoXO信号通路、磷酸肌醇代谢信号通路等。综上，V_C可能通过调控ST细胞周期、凋亡、自噬、代谢的相关基因和信号通路，继而提高ST细胞的增殖活力。