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番茄花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达

2001-11-30分类号:S572.035.3

【作者】黄晓璪  陈青  薛朝阳  周雪平
【部门】浙江大学生物技术研究所  浙江大学生物技术研究所  浙江大学生物技术研究所  浙江大学生物技术研究所 杭州310029   杭州310029   杭州310029   杭州310029
【摘要】从提纯病毒抽提基因组RNA ,并通过RT PCR扩增番茄花叶病毒 (ToMV)移动蛋白 (MP)基因。经克隆测序后插入植物表达载体PBI12 1的 35S启动子下游 ,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆 ,通过三亲交配导入农杆菌 ,叶盘转化法转化普通烟草。卡那霉素筛选获得一系列抗性小苗 ,对其进行PCR检测 ,Southern、Northern点杂交 ,Western blot检测 ,获得能正义、反义表达ToMVMP基因的转基因植株。
【关键词】番茄花叶病毒  移动蛋白  转基因  表达
【基金】浙江省青年科技人才专项基金 ; 教育部“跨世纪优秀人才培养计划”基金 ; 高等学校优秀青年教学;科 研奖励基金资助项目
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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