番茄花叶病毒移动蛋白基因转化烟草及在转基因烟草中的表达
2001-11-30分类号:S572.035.3
【部门】浙江大学生物技术研究所 浙江大学生物技术研究所 浙江大学生物技术研究所 浙江大学生物技术研究所 杭州310029 杭州310029 杭州310029 杭州310029
【摘要】从提纯病毒抽提基因组RNA ,并通过RT PCR扩增番茄花叶病毒 (ToMV)移动蛋白 (MP)基因。经克隆测序后插入植物表达载体PBI12 1的 35S启动子下游 ,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆 ,通过三亲交配导入农杆菌 ,叶盘转化法转化普通烟草。卡那霉素筛选获得一系列抗性小苗 ,对其进行PCR检测 ,Southern、Northern点杂交 ,Western blot检测 ,获得能正义、反义表达ToMVMP基因的转基因植株。
【关键词】番茄花叶病毒 移动蛋白 转基因 表达
【基金】浙江省青年科技人才专项基金 ; 教育部“跨世纪优秀人才培养计划”基金 ; 高等学校优秀青年教学;科 研奖励基金资助项目
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递