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刺槐离体叶片高效再生体系的优化

2023-04-15分类号:S792.27

【作者】韩娟  李亚鹏  田彦挺  郭琪  李云  孙宇涵  邓永平  牛东升  苏立琢  李秀宇  彭祚登  
【部门】国家林业和草原局刺槐工程技术研究中心北京林业大学林学院  国家林业和草原局刺槐工程技术研究中心林木育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室北京林业大学生物科学与技术学院  甘肃省清水县自然资源局  山西省吉县刺槐种子园  辽宁省凌海市生态建设发展中心  
【摘要】【目的】通过优化再生过程中的重要影响因素,建立刺槐离体叶片高效的再生体系,这将为刺槐苗木繁殖、诱变育种、遗传转化以及进一步开展刺槐分子育种等奠定良好的基础。【方法】以刺槐组培苗离体的叶片为外植体,观察叶片再生不定芽的整个过程,探究基因型、取材时期、黑暗处理时长以及植物生长调节剂对刺槐叶片再生不定芽的影响,同时筛选适合不定芽生根的IBA浓度。【结果】1)二倍体基因型普18-22再生能力最佳;2)组培苗继代45天为最佳外植体取材时期;3)黑暗处理14天为最佳黑暗处理时长;4)最佳的叶片再生不定芽的培养基为:MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1);普18-22不定芽诱导率达96.67%,平均每个叶片再生7.4个不定芽;5)不定芽生根最佳培养基为:1/2MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1);生根率达100%。【结论】以继代培养45天的二倍体刺槐组培苗普18-22叶片为外植体,接种至MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.1 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)的再生培养基中,黑暗处理14天后转移至正常光照培养,45天后将再生的不定芽转移至生根培养基1/2MS+蔗糖30 g·L~(-1)+琼脂6.5 g·L~(-1)+IBA 0.3 mg·L~(-1)中,待不定芽生根后进行炼苗移栽,得到完整的再生植株。
【关键词】刺槐  叶片  黑暗处理  植物生长调节剂  再生体系
【基金】北京林业大学青年教师科学研究中长期项目(2015ZCQ-SW-03);; 国家自然科学基金项目(31971675);; 国家重点研发课题(2017YFD0600503)
【所属期刊栏目】林业科学
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