斜带石斑白细胞cDNA文库的构建
2001-12-30分类号：Q785
【部门】中山大学生命科学学院 中山大学生命科学学院 中山大学生命科学学院 中山大学生命科学学院 广东广州510275 广东广州510275 广东广州510275 广东广州510275
【摘要】用Tripure试剂盒提取斜带石斑白细胞总RNA ,反转录合成第一链cDNA ,进行长距离PCR ,蛋白酶K消化 ,SfiI酶切 ,通过CHROMASPIN - 4 0 0柱 ,回收大于 5 0 0bp的cDNA ,与λTripIEx2载体连接 ,体外包装后构建了斜带石斑白细胞的cDNA文库。库容 1.6 5× 10 6,重组频率 82 % ,扩增后滴度 7.5× 10 9pfu·mL-1。插入片断长度 5 0 0～ 2 30 0bp ,最多的是在 75 0～ 10 0 0bp范围。本文库可作为筛选斜带石斑细胞因子基因的重要资源
【关键词】斜带石斑 白细胞 λTripIEx2 cDNA文库
【基金】
【所属期刊栏目】水产学报
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