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茶树NPF5基因克隆及其在不同氮素处理下的表达

2023-04-28分类号:S571.1

【作者】唐君  代祥  李贵飞  穆兵  王枫  杨亦扬  
【部门】江苏省农业科学院休闲农业研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室  南京农业大学园艺学院  
【摘要】NPF转运蛋白家族在植物转运硝态氮过程中起重要作用。为明确茶树中NPF基因的序列特征,用PCR扩增的方法在茶树中分别扩增出一个茶树氮转蛋白基因CsNPF5的DNA和cDNA全长,为2 096,1 440 bp。序列分析指出,该基因含有3个外显子和2个内含子,开放阅读框(ORF)为1 440 bp。序列分析结果显示,该基因编码479个氨基酸,相对分子质量约为53.12 ku,等电点为7.13,其编码蛋白的N端含有一个PTR2 Pfam结构域;亚细胞定位分析指出该基因编码蛋白定位于细胞质内;CsNPF5蛋白与中华猕猴桃NPF蛋白具有较高的同源性,相似度为79.54%;聚类分析指出,CsNPF5及其同源蛋白分别聚类成3个进化分支,且与来自中华猕猴桃NPF18同源蛋白聚到同一进化支上。同时qRT-PCR分析结果表明,在0~48 h氮素处理下CsNPF5在叶中的表达存在不同程度的上调表达,且基因上调表达丰度随NO~-_3浓度升高,响应时间更快,且在2 mmol/L NO_3~-处理24 h后,CsNPF5在茶树叶片中表达量出现峰值,这表明该基因表达受氮素诱导。
【关键词】茶树  氮转运蛋白  CsNPF5  氮素响应  表达分析
【基金】江苏省种业振兴揭榜挂帅项目(JBGS(2021)085);; 江苏省重点研发计划项目(BE2019379)
【所属期刊栏目】华北农学报
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