【摘要】Peptaibols是由真菌非核糖体肽合成酶(NRPS)合成的多肽抗菌素，能够抑制多种病原菌，促进植物生长和诱导细胞凋亡。为了深入探究木霉菌非核糖体肽类抗菌素合成的调控机制，为通过基因工程来提高Peptaibols产量提供帮助。通过设计引物，克隆长枝木霉菌非核糖体肽合成酶基因NP249的上游启动子区域，然后构建到一个具有绿色荧光蛋白基因(GFP)融合表达载体，验证基因NP249的启动子。以长枝木霉菌总DNA为模板，使用引物249-1B和249-4X,通过PCR技术扩增克隆到了NRPS的启动区域，全长1 204 bp。通过启动子NP249替代载体上GFP启动子，分别用BamHⅠ和XmaⅠ酶切pCX-62载体和启动子片段，T_4连接酶连接，构建GFP融合载体pCX-62-NP249-GFP。通过限制性内切酶介导的转化技术转化(REMI)木霉菌原生质体，得到的转化子转到含潮霉素的培养基上进行筛选，得到潮霉素抗性转化子Z249,进一步通过荧光显微镜检测转化子，转化子Z249能检测到GFP荧光。克隆到的启动子能启动GFP表达，具备启动子功能。