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克氏原螯虾PcCRCN-L基因的克隆鉴定及在低氧胁迫下的表达响应

2023-03-09分类号:S917.4

【作者】韩一鸣  鲁苏皖  许志强  徐宇  林海  潘建林  杨家新  李旭光  
【部门】南京师范大学海洋科学与工程学院  江苏省淡水水产研究所农业农村部淡水虾蟹遗传育种与养殖重点实验室  江苏海洋大学海洋科学与水产学院  
【摘要】虾青蛋白(Crustacyanin, CRCN)在甲壳动物脂类代谢及低氧胁迫应激调控等方面具有重要的功能。为获取虾青蛋白在克氏原螯虾(Procambarus clarkii)性腺发育和低氧胁迫应答中的作用,本研究在克氏原螯虾肝胰腺组织中鉴定出1个类虾青蛋白PcCRCN-L基因的cDNA序列,分析了PcCRCN-L基因的结构特征和进化模式,研究了PcCRCN-L基因在不同组织与性腺不同发育时期的表达特征,探讨了PcCRCN-L在低氧–复氧胁迫下的表达响应模式。结果显示,PcCRCN-L基因cDNA序列长2 700 bp,其开放阅读框(ORF)长度为1 587 bp,编码528个氨基酸残基;DNA序列长6 130 bp,位于克氏原螯虾基因组的第12号染色体,包含5个外显子和4个内含子,内含子/外显子剪接方式符合GT-AG规则。PcCRCN-L具有1个完整的lipocalin结构域,包含典型的序列保守区Ⅰ(SCR1)序列G-X-W、保守区Ⅱ(SCR2)序列T-D-Y和保守区Ⅲ(SCR3)序列精氨酸R。多序列比对与系统进化分析结果显示,PcCRCN-L独立于传统虾青蛋白A和C亚族,单独聚为一支。PcCRCN-L在克氏原螯虾多个组织中均有表达,在肝胰腺中表达量最高;在性腺不同发育时期,肝胰腺以及卵巢组织中的PcCRCN-L基因表达量显著降低;低氧胁迫下,肝胰腺组织中PcCRCN-L表达量显著降低,复氧后显著升高。研究结果表明,PcCRCN-L与克氏原螯虾性腺发育密切相关,并参与了克氏原螯虾的低氧–复氧胁迫应激调控。
【关键词】克氏原螯虾  类虾青蛋白  组织表达  性腺不同发育时期  低氧胁迫
【基金】江苏省种业振兴“揭榜挂帅”项目(JBGS(2021)119);; 国家重点研发计划创新专项(2020YFD0900303);; 江苏现代农业重点项目(BE2020348);; 江苏现代农业产业技术体系项目(JATS[2022]411);; 江苏省农业重大新品种创制项目(PZCZ201746)
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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