柑橘采后青霉病原中寄生病毒的筛选与鉴定
2023-02-02分类号:S436.66
【部门】西华师范大学生命科学学院
【摘要】【目的】从采后霉烂柑橘上分离青霉病原菌,并筛选、鉴定病原中寄生的青霉病毒。【方法】以柑橘园腐烂的柑橘为材料,挑取分生孢子在PDA培养基上进行划线分离,根据总基因组电泳图谱筛选具有基因组额外核酸片段的病毒菌株,并使用RT-PCR扩增额外片段测序鉴定相应病毒。【结果】根据菌落形态初步分组,分离到两类菌落特征差异明显的青霉菌(共25株),其中具灰绿色菌落的青霉16株,具暗黄绿色菌落的青霉9株。扩增两类青霉的代表菌株(DY10和DY18)的ITS测序,鉴定结果显示,分别为意大利青霉(Penicillium italicum)和指状青霉(P. digitatum)。青霉菌株总基因组电泳筛选发现,DY9、DY11、DY12、DY17菌株中存在约6000 bp的基因组额外片段,推测可能为指状青霉病毒1 (PdV1)同种不同病毒株的基因组。根据PdV1基因组设计特异性引物,RT-PCR扩增出约500 bp的条带,测序序列与PdV1基因组同源序列的一致性高达99.7%,将所分离的病毒鉴定为PdV1同种的不同病毒株。【结论】本研究从腐烂柑橘上分离鉴定意大利青霉16株和指状青霉9株,并从指状青霉菌株中筛选、鉴定出4株与维多利亚病毒属(Victorivirus) PdV1同种的不同病毒株,为柑橘绿霉病的绿色防控提供潜在的生防病毒资源。
【关键词】意大利青霉 指状青霉 抗药性 生物防治 真菌病毒
【基金】国家自然科学基金项目(32001861);; 西华师范大学英才基金项目(17YC343)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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