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外源的微藻DGAT基因表达对酿酒酵母生长和脂质的影响

2023-01-19分类号:TQ920.1

【作者】胡澄溪  刘伟  毕燕会  周志刚  
【部门】上海海洋大学水产遗传资源开发利用教育部重点实验室  上海海洋大学科技部海洋生物科学国际研究中心  
【摘要】三酰甘油(TAG)合成缺陷型酿酒酵母突变株H1246常用于其他生物二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)的基因功能鉴定。为了解外源DGAT的基因表达对酵母细胞脂质及生长的影响,实验将缺刻缘绿藻1个I型和3个II型的DGAT分别转化H1246菌株,经筛选获得tDGAT1、tDGAT2A、tDGAT2B及tDGAT2C等4株转目的基因酵母。通过显微观察、分光光度法、重量法、棒状色谱分析、气相色谱-质谱分析对酿酒酵母的形态和脂滴、细胞密度、生物量、总脂、总脂肪酸以及TAG含量进行检测。稳定生长期时的显微观察结果显示,这4个外源基因均能使H1246菌株恢复TAG的合成和贮存能力进而在细胞中出现油滴;油脂分析结果表明,tDGAT1菌株的TAG及脂肪酸含量最高,且显著高于野生型Scy62及其他3株转目的基因菌株的水平;生长性能的数据显示,4个外源基因均能使H1246菌株的细胞密度达到Scy62的水平,这可能是由于TAG的合成消耗了游离脂肪酸,以减轻其对细胞产生的伤害而致;但tDGAT1菌株的生长迟滞期明显延长,以致其生长速率最低。本研究结果表明,将缺刻缘绿藻不同类型的外源DGAT转化酿酒酵母后,使后者的生长性能及脂质含量产生不同的变化。该结果为利用基因工程改造酵母菌株以生产人类所需要的目的油脂研究奠定了基础。
【关键词】酿酒酵母  缺刻缘绿藻  二酰基甘油酰基转移酶(DGAT)  三酰甘油(TAG)  生长
【基金】国家自然科学基金(31772821);; 国家“双一流”水产学科
【所属期刊栏目】水产学报
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