花鲈ncc、nkcc基因在海、淡水适应中鳃组织的表达与定位分析
2023-02-23分类号:S917.4
【部门】中国海洋大学水产学院海水养殖教育部重点实验室
【摘要】为探究ncc、nkcc基因在花鲈渗透调节中发挥的作用,本实验通过全基因组鉴定、多重序列比对、系统进化树构建以及蛋白结构预测对花鲈ncc进行了鉴定及序列分析,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测花鲈ncc和nkcc在海、淡水鳃组织中的表达水平,利用原位杂交技术确定ncc2和nkcc1a在淡水及海水花鲈鳃中的表达位置。结果显示,从花鲈中鉴定出2个ncc基因,ncc1和ncc2,其CDS长度分别为2 691和3 120 bp,编码896和1 039个氨基酸,在进化上具有保守性。ncc2基因在淡水花鲈鳃组织中的表达量显著高于海水,而nkcc1a在海水花鲈鳃组织中的表达量显著高于淡水,ncc1、nkcc1b、nkcc2在海淡水中的表达量则没有显著差异。并且淡水适应过程中花鲈鳃组织中的ncc2的表达量逐渐上调,而nkcc1a的表达量逐渐下调;海水适应过程则呈现相反的表达趋势。此外,原位杂交结果显示ncc2和nkcc1a基因分别位于淡水与海水中鳃组织的相邻鳃小片间的鳃丝上皮。以上结果表明,ncc2和nkcc1a基因分别编码淡水及海水花鲈鳃中重要的Na~(+)及Cl~(-)离子转运蛋白亚型,可作为区分淡水、海水养殖花鲈的分子标志物,在渗透调节及盐度适应中发挥重要作用。
【关键词】花鲈 ncc nkcc 鳃 渗透调节
【基金】国家重点研发计划(2020YFD0900204);; 国家自然科学基金(32072947);; 现代农业产业技术体系-国家海水鱼产业技术体系(CARS-47)
【所属期刊栏目】水产学报
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