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降钙素基因相关肽在牦牛附睾中的定位与表达

2022-09-07分类号:S823.85

【作者】陈少宇  袁莉刚  杨大鹏  王华  张勇  
【部门】甘肃农业大学动物医学院甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室  
【摘要】[目的]分析降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在牦牛附睾中的转录水平及蛋白分布特点,探究其对精子运输及成熟的功能。[方法]采集6头3~4岁健康成年牦牛的附睾,将其解剖为头、体、尾三部分,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、Western blotting分别检测CGRP mRNA和蛋白在附睾的头、体、尾中的表达水平;采用H.E染色法分析附睾组织结构特点;采用免疫组化和免疫荧光技术分析附睾各部分CGRP的分布及表达情况。[结果]RT-qPCR结果表明,CGRP在牦牛附睾头的相对表达量显著高于附睾体和附睾尾(P<0.05),附睾尾表达量最低(P<0.05)。显微镜下观察表明,牦牛附睾组织纤毛长度从头部至尾部逐渐降低,差异显著;附睾头间质组织的间质平滑肌层厚度显著低于附睾体和附睾尾(P<0.05);基细胞和晕细胞在附睾尾分布显著,上皮厚度亦在附睾尾显著降低。免疫组化及免疫荧光分析发现,CGRP主要分布于附睾上皮、基底膜及附睾间质小血管,附睾上皮晕细胞的表达强度最高。[结论]CGRP主要分布于牦牛附睾上皮和间质小血管,提示CGRP对牦牛附睾间质小血管的收缩发挥调节作用。牦牛附睾尾晕细胞数量最多,晕细胞中CGRP的高强度表达提示其可能参与附睾尾的免疫调节。
【关键词】降钙素基因相关肽(CGRP)  牦牛  附睾  晕细胞
【基金】甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室建设项目(20JR10RA563);; 甘肃农业大学科技创新基金项目(GAU-XKJS-2018-056);; 宁夏回族自治区农业特色优势产业育种专项(2013NYYZ0402)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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